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全自动组织研磨机研磨破碎酵母细胞
发布时间:2019-01-03   点击次数:316次

多年来,酵母菌在生物化学、遗传和分子分析等方面取得了大量的研究成果,已成为生物制药研究者的模型生物系统和工具。因此,酵母已成为基因表达研究和重组蛋白的常用载体。尽管研究中使用的酵母种类很多,包括Pichia、Hansen和Debali酵母,但酵母是常用的。

传统的酶法很难从细胞中提取完整的酵母RNA和细胞内蛋白。溶菌酶通常是粗制滥造的,含有RNA酶和蛋白酶,不仅破坏细胞壁,而且破坏靶分子。此外,原生质体的酶解通常需要添加洗涤剂,这会导致各种蛋白质的失活。因此,机械裂解或破坏酵母细胞通常需要释放小分子。

1、粉碎前的准备:

0.1g细菌(本实验以0.1g菌体为例);XX钢珠;研磨机(选用品牌新锐精仪Gd-300);XX研磨罐。

2、磨削加工。

将0.1g细菌与30MLPBS溶液混合,用移液管均匀滴入液氮。收集冷冻的球。频率调整到XXHz,振动时间为XXS。取出研磨罐,放入液氮预冷XXS,取出再研磨。

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